微流成像仪依靠微流道微量进样、高清成像完成颗粒形貌、粒径、杂质分析,对样品状态、进样速度、操作规范性极其敏感。不标准的进样操作容易产生气泡、流道堵塞、图像模糊、数据重复性差等问题。为保证检测数据精准、保护微流芯片与光学系统,现将标准样品进样操作规范整理如下。
一、进样前样品预处理规范
1. 样品均质处理:检测前将样品轻柔摇匀、颠倒混匀,避免颗粒沉降分层;禁止剧烈震荡,防止产生大量微气泡影响成像。
2. 去除大颗粒杂质:根据样品特性提前进行粗过滤,去除纤维、大团聚颗粒、沉淀物,防止堵塞微流芯片微细通道。
3. 脱泡处理:含气泡样品需静置脱泡或低速离心脱泡,微气泡会被误判为颗粒杂质,造成数据虚高、图像干扰。
4. 温度适配:样品温度尽量接近设备室温,避免温差导致流道产生冷凝、液体对流异常,影响成像稳定性。
二、设备进样前准备
1. 开机预热完成,确认光源、镜头、流道系统自检正常,无报错、无基线异常。
2. 检查微流芯片洁净通透,流道内无残留污渍、无残液、无往期样品残留。
3. 进样针筒、管路提前用待测样品润洗2~3次,消除残留溶剂、清洗液带来的背景干扰。
4. 调整设备水平、固定进样位置,保证进样平稳、无晃动偏移。
三、标准进样操作流程
1. 缓慢匀速进样:采用低速、稳定流速进样,严禁快速推注、脉冲式进样,防止流速过快造成颗粒挤压、流道紊流、图像拖影模糊。
2. 排净管路空气:进样前段充分排尽管路气泡,待流道液流稳定、视野无气泡后再开始采集图像数据。
3. 稳定流态再检测:进样后等待2~5秒流态稳定,流道液体无流动波动、无残影,再启动测试采集。
4. 统一进样量标准:同批次样品统一进样体积与流速参数,保证平行样测试条件一致,提升数据重复性。
5. 全程连续观察视野:进样过程实时观察成像画面,出现气泡、遮挡、模糊立即暂停进样处理。
四、平行样与批次进样规范
1. 每批次样品测试前做空白基线校准,排除管路、溶剂、环境干扰。
2. 不同样品交替测试时,必须充分清洗流道与进样管路,杜绝样品交叉污染。
3. 平行样品保持相同进样速度、采集帧数、曝光参数,保证数据对比有效。
五、常见进样问题与纠正方法
1. 成像模糊、拖尾:进样流速过快、流态不稳,降低进样速度、延长稳定时间。
2. 频繁出现气泡干扰:样品未脱泡、管路未排空气,重新脱泡、润洗管路、低速排气。
3. 数据重复性差:样品沉降、进样力度不均,加强混匀、统一进样参数。
4. 流道堵塞:样品含大颗粒杂质,加强前置过滤,及时清洗疏通芯片流道。
六、进样操作禁忌
1. 禁止未脱泡、未过滤样品直接上机进样测试。
2. 禁止高速、暴力推注进样,避免损伤微流芯片、破坏流道结构。
3. 禁止不同样品直接交替测试,不做中间清洗。
4. 视野存在气泡、污渍、模糊时禁止强行采集数据。
七、操作总结
严格执行微流成像仪标准进样操作,是保证颗粒成像清晰、粒径统计准确、批次数据稳定的关键。规范样品预处理、匀速稳流进样、批次质控,可有效规避气泡、堵塞、交叉污染、数据偏差等问题,保障设备长期稳定、精准完成各类样品微流成像检测。