一、样品前处理基本原则
微流成像仪依靠微流通道与光学成像进行颗粒、细胞、微球等检测,样品洁净度、浓度、分散性直接影响成像效果与数据准确性,前处理核心是除杂质、防团聚、控浓度、除气泡。
二、样品稀释与浓度控制
根据仪器量程稀释样品,避免浓度过高造成颗粒堆叠、重叠成像,浓度过低导致检测数据不足。
优先使用超纯水、缓冲液稀释,保证与仪器微流体系兼容性,不产生沉淀结晶。
稀释后充分轻柔混匀,禁止剧烈震荡,防止产生大量气泡干扰成像。
三、过滤除杂,避免通道堵塞
含有大颗粒、纤维、絮状物的样品,使用合适孔径滤膜过滤,去除杂质,防止堵塞微流芯片与流道。
过滤后及时检测,避免长时间放置出现沉降、团聚。
油性、高粘度样品可适当稀释降粘,保证样品在微流通道内稳定流动。
四、分散处理,防止颗粒团聚
易团聚样品可低速涡旋、超声短时间分散,超声时间不宜过长,避免颗粒破碎。
可添加少量分散剂,改善颗粒分散状态,提升成像清晰度。
生物类样品避免剧烈处理,防止细胞破损、形态改变。
五、除气泡关键操作
样品静置脱气,或低速离心去除微小气泡。
进样前润洗进样管路与芯片,排尽管路空气。
气泡会造成阴影、伪影,导致粒径、计数结果偏差,必须彻底去除。
六、生物样品特殊前处理
细胞、微生物样品保持适宜渗透压,避免裂解变形。
血清、体液类样品离心去除细胞碎片、蛋白絮状物,必要时过滤。
全程避光、控温,维持样品原有形态。
七、进样前检查与注意事项
检查样品无沉淀、无分层、无明显气泡。
样品温度与仪器环境温度接近,避免温差产生气泡。
前处理耗材洁净,避免引入外来颗粒污染,造成假阳性颗粒计数。